原子力显微镜术-经分析细胞表面各点的力学特性
信息分类:金相文章
作者:yiyi发布
时间:2011-12-6 18:00:55
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原子力显微镜术（AFM）除具有极佳的高解析度与简单的样本前处理之外，因也可在液相中取像，已有许多文献用来观察微生物、细胞的微结构，
亦有藉之扫描到病毒感染细胞后其表面的出芽模形态，甚至用以探讨某些病毒外套膜的表面特徵。本研究首先，以兼嗜性野生型小鼠白血病病毒（MMLV），
分别去感染人类膀胱癌细胞（J82）、人类肺癌细胞（A549）及老鼠纤维母细胞（NIH3T3）等三种宿主细胞，对照性地再以亲嗜性MMLV进行宿主与非宿主细胞受感染6 hr后之细胞膜表面的观察，黏贴于培养皿上的细胞样本，先以福马林固定及磷酸盐缓冲液、去离子水清洗，继而在空气中自然乾燥后进行AFM扫描。结果显示，当NIH3T3细胞受上述两种MMLV感染时，均在其表面上发现许多可能是病毒融合或细胞胞饮作用所造成的孔洞。这在J82及A549细胞受兼嗜性 MMLV感染时亦被发现，然若是受亲嗜性MMLV感染的话，则无此类似的现象。其次，我们也将上述的亲嗜性MMLV与其经外套膜蛋白上修饰Arg- Gly-Asp（RGD）的MMLV，分别探讨其对仓鼠口腔癌细胞（HCDB-1）、人类微血管表皮细胞（HMEC-1）两种非宿主细胞，以及 NIH3T3宿主细胞感染能力的影响。其结果得知，受RGD修饰之MMLV感染的HCDB-1、HMEC-1，亦会出现和NIH3T3之细胞膜表面上类似的凹陷及孔洞现象，显示经修饰后的病毒可能已转变成可对非宿主细胞具感染作用。最后，为要建立液相中病毒感染细胞的过程的观察可能性，我们也尝试了在液相中活体细胞表面的扫描技术探讨，并藉仪器上的力调变显微镜术纪录与力/位移曲线，量测整个细胞表面软硬的分佈。经分析细胞表面各点的力学特性，由杨氏係数求取得知，细胞核中心部位为其周围区域的0.05倍。
亦有藉之扫描到病毒感染细胞后其表面的出芽模形态，甚至用以探讨某些病毒外套膜的表面特徵。本研究首先，以兼嗜性野生型小鼠白血病病毒（MMLV），
分别去感染人类膀胱癌细胞（J82）、人类肺癌细胞（A549）及老鼠纤维母细胞（NIH3T3）等三种宿主细胞，对照性地再以亲嗜性MMLV进行宿主与非宿主细胞受感染6 hr后之细胞膜表面的观察，黏贴于培养皿上的细胞样本，先以福马林固定及磷酸盐缓冲液、去离子水清洗，继而在空气中自然乾燥后进行AFM扫描。结果显示，当NIH3T3细胞受上述两种MMLV感染时，均在其表面上发现许多可能是病毒融合或细胞胞饮作用所造成的孔洞。这在J82及A549细胞受兼嗜性 MMLV感染时亦被发现，然若是受亲嗜性MMLV感染的话，则无此类似的现象。其次，我们也将上述的亲嗜性MMLV与其经外套膜蛋白上修饰Arg- Gly-Asp（RGD）的MMLV，分别探讨其对仓鼠口腔癌细胞（HCDB-1）、人类微血管表皮细胞（HMEC-1）两种非宿主细胞，以及 NIH3T3宿主细胞感染能力的影响。其结果得知，受RGD修饰之MMLV感染的HCDB-1、HMEC-1，亦会出现和NIH3T3之细胞膜表面上类似的凹陷及孔洞现象，显示经修饰后的病毒可能已转变成可对非宿主细胞具感染作用。最后，为要建立液相中病毒感染细胞的过程的观察可能性，我们也尝试了在液相中活体细胞表面的扫描技术探讨，并藉仪器上的力调变显微镜术纪录与力/位移曲线，量测整个细胞表面软硬的分佈。经分析细胞表面各点的力学特性，由杨氏係数求取得知，细胞核中心部位为其周围区域的0.05倍。
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