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细胞内一些物质吸收专一波长的紫外光,例如核酸吸收260nm范围的光,蛋白质吸收
280nm的光,可用显微镜紫外光吸收光度术测最,该法的优点是不需要对样品染色,就可以观
察和
测量活细胞的某些组分。但是,核酸对紫外光的特异性吸收,是因为I A-4岭和99碱的存
在,因而DNA, RNA和核昔酸对260nm的光都有吸收。所以,紫外光吸收光度术对DNA
和RNA只能定位,不能鉴别,因而发展了可见光吸收光度术。可见光吸收光度术是基于细
胞内蛋白质、多糖、核酸和脂类能在不同的等电点下电离出不同的测量,因而造成染色亲合力
不同,应用不同的化学试剂染色,可使各种细胞成分染上不同的颜色,在显微镜下成为可见的
结构,它们对可见光(400-700nm)范围的光波具有特异的吸收,从而可用可见光吸收光度术
进行定量测量。
显微镜吸收光度法除测定细胞内化学物质外,还可用于检定组织切片中酶的活性,主要应
用惰性组织稳定剂(如聚乙烯醉)、凝胶片、混合的集聚免疫组织化学方法和半透膜方法。现巳
能定量测定细胞和组织切片中30种以上的酶(氧化还原酶及其它酶类))o
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科